灵芝防治神经系统疾病的实验研究进展

• 灵芝为担子菌纲多孔菌科（Polyproraceae）灵芝属 （Ganoderma） 真菌赤芝 ［Ganoderma lucidium（Leyss. exFr.） Karst.］ 和紫芝 ［Ganoderma japonicum （Fr.） Lloyd.］的总称，灵芝性微温，气特殊，味微苦涩。灵芝作 为药物有着悠久的历史，我国最早的药学专著《神农本 草经》将灵芝列为上品，称之为“上上之药，方中妙品”， “赤芝，主胸中结，益心气，补中，增智慧，不忘。久食， 轻 身不老,延年神仙。”是有效无毒的药物，为滋补强壮、 扶 正固本的珍品。现代药理研究表明，灵芝对人体免疫系 统、呼吸系统、心血管系统、神经系统等均有很好的调节 作用， 同时具有抗肿瘤、抗氧化作用[1]。研究较多的灵芝 化学成分有：多糖类、甾醇类、核苷类、三萜类化合物、 生 物碱类、呋喃衍生物、氨基酸多肽类、无机元素、脂肪酸 等。目前世界上许多国家的医学家对灵芝密切关注， 正如日本专家所云：全世界已形成一个方兴未艾的灵芝 热, 研究和开发工作正在紧锣密鼓地进行着[2]。20 世纪 90 年代末以来，许多学者开始积极研究灵芝防治神经 系统疾病的作用及其可能机制。现就近年来关于灵芝 治疗神经系统疾病的研究作一综述。

  1 灵芝防治脑血管疾病 夏一鲁等[3]研究灵芝水溶性提取物（extraction of ganoderma lucidum， EGL）对脑缺血大鼠预防性保护机 制，检测大鼠脑梗死区 rCBF、 SOD、 Na+-K+-ATP 酶活 性，结果显示治疗组 SOD、 Na+-K+-ATP 酶活性更高， rCBP改善仅出现于梗死后第 5 天，且预梗死体积缩小 和组织学恢复无关， 认为保护 SOD、 Na+-K+-ATP酶可能 是EGL发挥其预防性保护的机制之一。 Zhao HB等[4]对 灵芝发挥神经保护作用的有效成分进行研究， 从灵芝子 实体中提取纯化出一种新甾醇类化合物（Ganoderma lucidum sterol， GS）对体外培养大鼠大脑皮层神经元缺 血缺氧再灌注（I/R）损伤具有保护作用，此作用与 GS降 低损伤神经元内异常升高的丙二醛（MDA）水平，明显 增强神经元内超氧化物歧化酶（SOD）及 Mn-SOD 活性

  以及拮抗 NF-κ B活化与核转位，抑制 I-κ B降解有关。 此外， GS 还使损伤神经细胞培养上清中 TNF-α和 IL1β的水平降低。随后的体内研究结果与体外研究相符， 观察到 GS可降低局灶性脑缺血再灌注损伤（I/R）大鼠 脑水肿的程度，改善神经运动功能障碍，减轻病理组织 学改变，降低大脑组织 MDA水平，升高 SOD和 MnSOD的活性，对脑缺血-再灌注损伤有明显的保护作用, 这一结果为灵芝用于缺血性脑损伤等提供了初步的理 论根据[5]。另外， Zhao HB等[6]体外进行 I/R 实验表明， 灵芝多糖可能对缺氧复氧诱导的氧化应激和 Mn-SOD 起到关键的神经保护作用。可见，目前关于灵芝保护缺 氧复氧诱导的神经损伤集中在其抗氧化和抗炎作用， 其 他损伤机制仍需进一步研究。

  2 灵芝防治神经变性疾病

  寻找促神经生长、预防和治疗神经损伤及神经退行 性变的有效药物是当今医药研究中引人关注的课题。 天然的保护和促进神经生长的物质乃是神经科学、 中医 药学中的一个研究热点。PC12 细胞是目前广泛用来研 究神经细胞功能、分化和凋亡的一种组织细胞培养模 型。它可在神经生长因子（NGF）诱导下分化成神经元样 细胞。NGF通过激活酪氨酸激酶相关的受体 TrkA完成 信号转导, 抑制 PC12 细胞增殖、促进分化、诱导细胞长 出大量突起,已被作为判断细胞是否分化的指标之一。 Cheung WM等[8]研究证明，中药灵芝的水溶性提 取物能明显地诱导 PC12 细胞分化, 且能明显地抑制神 经营养因子（NGF）依赖的神经元化 PC12 细胞凋亡。张 丽等[10]对其有效成分进行研究，结果显示灵芝酯溶性提 取物的浓度 125～ 500 mg·L–1 均可诱导 PC12 细胞突起 生长,其中以 500 mg·L-1 的浓度作用最明显。灵芝提取 物与低浓度的 NGF 合用时对 PC12 细胞的分化有明显 的促进作用，荧光显微镜下 MAP2-阳性细胞增多，认为 其能诱导 PC12 向神经细胞分化。另外，张骐[11]等发现 灵芝多糖肽能促进氧化应激损伤 PC12 细胞的存活，抑 制 H2O2 诱导的 PC12 细胞凋亡，对氧化应激损伤 PC12 细胞具有保护作用，其效果与神经生长因子相似。这为 研究灵芝治疗神经系统变性疾病提供初步证据。以下 分述灵芝防治几种常见神经系统变性疾病的研究进展。 2.1 灵芝防治帕金森病（Parkinson’ s disease， PD） 谢 安木等对 PD动物模型黑质的超微结构及灵芝孢子 粉对这些超微结构的影响，发现 PD组大鼠有较多的凋 亡的神经细胞，线粒体嵴不清、内质网扩张。灵芝孢子 粉预处理组存在轻度的线粒体嵴不清、内质网扩张， 偶见凋亡的神经细胞， 从形态学上说明神经细胞的凋亡在 PD的发病机制中具重要作用，同时灵芝孢子粉对黑质 神经细胞具有保护作用。谢安木等[13]进一步通过免疫 组化、原位杂交及 Western blot 技术检测 6-羟多巴（6OHDA） PD模型鼠脑黑质酪氨酸羟化酶（TH）的表达, 高效液相色谱检测术侧鼠脑黑质多巴胺（DA）水平，发 现灵芝孢子能够提高 TH 的表达, 并提高鼠脑黑质 DA 的水平, 推测对 6-OHDA诱导的 PD可能有脑保护作 用。朱蔚文等用 MPTP小鼠 PD模型对灵芝孢子油进 行研究，发现其能明显改善 MPTP 小鼠模型行为学，增 加纹状体 DA及其代谢物含量，减少黑质 DA能神经元 的损伤，认为灵芝孢子油可能具有减缓 PD病变进程的 神经保护作用。杨海华等研究灵芝孢子粉对脂多糖 （LPS）所致的多巴胺能神经元变性的影响，发现灵芝孢 子粉的干预可有效改善 LPS大鼠的旋转行为，减少黑 质多巴胺能神经元的损伤。 

  2.2 灵芝防治阿尔茨海默病（Alzeimer’ s disease,AD） 郭燕君等[16]在大鼠双侧海马内一次性注射 β 2 淀粉样多 肽 25～ 35 片段（Aβ 25～ 35）制作大鼠 AD 模型,腹腔注射 灵芝多糖水溶液, 1 周后进行 Morris 水迷宫检测大鼠 空间学习记忆能力变化,分光光度法测定大鼠海马组织 SOD活性和 MDA含量, 透射电镜观察海马神经元的超 微结构变化，发现灵芝多糖能明显改善 AD模型大鼠低 下的空间学习记忆能力, 显著提高模型大鼠海马组织 SOD 活性及降低 MDA 含量,而且灵芝多糖能明显改善 模型大鼠脑组织海马 CAl 区神经元的退行性变化。 2.3 灵芝防治运动神经元病 张伟等通过建立机械 损伤脊髓运动神经元的动物模型， 首先发现灵芝孢子可 以促进大鼠受损伤的脊髓运动神经元和脊髓背核神经 元的存活， 随后又发现灵芝孢子对受损伤脊髓运动神 经元的轴突再生也有明显的促进作用。通过蛋白质双 向电泳方法寻找与灵芝孢子促进受损伤脊髓运动神经 元存活及其轴突再生相关的蛋白质， 进一步研究灵芝孢 子促进受损伤的神经元存活及其轴突再生的分子机制。 CRMP-2 和 FCP-β是轴突再生密切相关的两种蛋白 质。IDH-β是线粒体三羧酸循环中的限速酶之一， ATPase 是线粒体内膜电子传递链中合成 ATP 的最终 蛋白质， GOT 是苹果酸- 天冬氨酸穿梭过程中的关键 酶， 控制着细胞液中的还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸进 入线粒体内参与ATP 的合成。M2-PK是糖无氧酵解的 限速酶之一，其表达降低可以减少糖的无氧酵解，从而 使糖原获得高效的利用。研究结果表明， 灵芝孢子可 能通过上调或下调上述蛋白质的表达， 参与促进大鼠受损伤脊髓运动神经元存活及其轴突再生作用。

  3 灵芝防治癫痫

  基于已发现灵芝对多种神经系统疾病具有神经保 护作用， 21世纪初，学者们开始研究灵芝对癫痫的防治 作用。王欢等观察灵芝孢子粉对癫痫大鼠模型皮质 和海马区谷氨酸、 γ - 氨基丁酸含量及神经元形态学变 化，发现其能有效降低皮质和海马区兴奋性氨基酸谷氨 酸的含量，降低病变神经元兴奋性以达到抗癫痫作用增 强抑制性氨基酸氨基丁酸的表达，使神经元兴奋性减 弱，抑制癫痫的发作。王伟群研究灵芝孢子粉对致 痫大鼠大脑细胞因子 IL-1β和原癌基因 c-fos影响。结 果发现，灵芝孢子粉能有效降低癫痫大鼠脑组织 IL-1β 水平；灵芝孢子组大鼠脑皮质与海马的 c-fos 表达减 弱，阳性细胞数减少，但与空白组比较表达仍增强。由 此可见，灵芝孢子粉具有抑制神经胶质产生 IL-1β和 降低脑内的 c-fos基因表达而起到抗癫痫作用。癫痫致 脑损伤已被许多动物实验和临床观察所证实，神经细胞 凋亡是最近发现的癫痫脑损伤的又一途径。赵爽等进一步探讨癫痫的发病机制及灵芝孢子粉的作用机制， 研究表明 IGF-1、 NF-κ B及神经细胞凋亡均可能参与了 PTZ致痫的发生发展过程，灵芝孢子粉能明显抑制 NFκ B蛋白的表达，增强 IGF-1 的免疫反应性，可能是其对 癫痫所致神经细胞凋亡有明显抑制，从而对神经细胞起 保护作用的机制之一。

  4 结语

  目前，大量实验研究显示，灵芝及其提取物的有效 成分能充分作用于脑组织，有神经保护作用，对于脑血 管病、 帕金森病、癫痫等具有良好的临床应用前景， 今后 还可进一步研究其对神经系统的其他疾病如重症肌无 力、周围神经病等的影响。但灵芝的药理作用复杂， 应 采用现代科学手段对灵芝有效成分进行分离，并进一步 深入探讨其神经保护机制，有助于开发临床安全高效的 神经保护药物，为临床应用提供依据。